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熒光顯微鏡光學鏡片分�

2024-06-01 林樹�

熒光顯微鏡是一種利用熒光物質發(fā)射特定波長的光來觀察樣品的光學顯微�一般作為觀察透明或者內部結�不能很好地從顏色上進行很好的區(qū)�樣本的觀察設�,它能夠解決普通顯微鏡無法觀察透明物質的問��在生�、醫(yī)�、材料科學等領域中應用廣�,尤其是在細胞生物學、免疫學和病理學等領�熒光顯微鏡的光學鏡片是實�(xiàn)其高性能成像的關鍵部��

 熒光顯微鏡光學鏡片分析

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光學鏡片類型

熒光顯微鏡的光學鏡片主要包括照明物鏡、檢測物鏡和其他輔助鏡片�

照明物鏡:負責將激光或其他光源產生的光照射到樣品上,形成光片。為了減少光誘導的光損傷和光毒�,通常采用低數(shù)值孔徑(NA)的照明物鏡�

檢測物鏡:負責收集樣品發(fā)出的熒光信號,并將其傳輸?shù)教綔y器或成像設備。檢測物鏡通常具有較高的NA,以提高熒光信號的收集效��

輔助鏡片:包�濾光��二向分光�等,用于調整光路、選擇特定波長的光等�

熒光顯微鏡工作原理

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工作原理

熒光顯微鏡的工作原理可以簡化為光� � 激�(fā)濾光� � 樣品 � 熒光�(fā)� � �(fā)射濾光片 � 光學系統(tǒng)(物�、聚光鏡� � 目鏡/成像系統(tǒng)�

光源�熒光顯微鏡通常使用高壓汞燈、氙燈或者激光器作為光源,這些光源能夠�(fā)出特定波長的�,用于激�(fā)樣品中的熒光物質�

激�(fā)濾光片:光源�(fā)出的光首先通過激�(fā)濾光片,這個濾光片的作用是選擇性地透過能夠激�(fā)樣品中熒光物質的特定波長�,同時屏蔽其他波長的��

樣品:樣品中加入了熒光染料或標記的分子,這些分子在激�(fā)光的照射下會吸收能量并躍遷到激�(fā)�(tài)�

熒光�(fā)射:激�(fā)�(tài)的分子會自發(fā)地從激�(fā)�(tài)返回基態(tài),并�(fā)出熒光信號。這個熒光信號的波長通常與激�(fā)光的波長不同,可以通過�(fā)射濾光片進行選擇�

�(fā)射濾光片:發(fā)射濾光片的作用是選擇性地透過熒光信號,同時屏蔽激�(fā)光和其他雜散光,以提高成像的信噪��

光學系統(tǒng):熒光顯微鏡的光學系�(tǒng)由物�、聚光鏡等部分組�。物鏡將樣品�(fā)出的熒光信號放大,聚光鏡則幫助將光線聚焦于樣品上�

目鏡和成像系�(tǒng):目鏡用于進一步放大物鏡中的圖像,使觀察者能夠清晰地看到樣品中的細節(jié)。同�,熒光顯微鏡還可以配備CCD相機等成像系�(tǒng),將熒光圖像�(shù)字化并保存下��


 熒光分析BP532帶桶濾光片

熒光分析BP532帶通濾光片

特點

照明與檢測解耦:熒光顯微鏡通過將照明和檢測光路解�,允許采用新穎的照明策略來優(yōu)化儀器的光子收集效率。這種設計可以最大程度地減少樣品在光線下的曝�,從而減少對樣品的損害�

高分辨率:熒光顯微鏡能夠實現(xiàn)高分辨率的成�,尤其是結合高NA的檢測物鏡時。這使得熒光顯微鏡能夠詳細觀察細胞和亞微觀細胞成分的結構和活動�

高靈敏度:熒光顯微鏡對熒光信號的檢測具有高靈敏度,能夠檢測到微弱的熒光信�。這使得熒光顯微鏡在檢測細�、病毒等微小生物體時具有�(yōu)勀�

 熒光顯微鏡分析圖

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實戰(zhàn)應用

生物學領域:熒光顯微鏡在生物學領域中的應用廣泛,包括細胞生物�、免疫學和神�(jīng)科學等。通過熒光染料的標記,可以準確而詳細地識別細胞和亞微觀細胞成分的結構和活動�

�(yī)療領域:熒光顯微鏡在�(yī)療領域中的應用包括病理學、臨床診斷和�(yī)學影像學�。例�,熒光顯微鏡可以用于觀察和診斷癌癥細胞、病毒感染和其他疾病�

材料科學領域:在材料科學領域,熒光顯微鏡可用于研究材料的結構、性能和功�。它可以幫助科學家們觀察材料的微觀結構,從而優(yōu)化材料的設計和應��

 

總結

熒光顯微鏡的光學鏡片是實�(xiàn)其高性能成像的關鍵部�。通過照明與檢測解耦的設計,熒光顯微鏡能夠最大程度地減少樣品在光線下的曝�,同時實�(xiàn)高分辨率和高靈敏度的成像。在生物�、醫(yī)療和材料科學等領域中,熒光顯微鏡的應用廣泛,為科學研究和�(yī)學診斷提供了有力的工��